Дио лечение
Назад

Анализ крови на сифилис – правила и методы сдачи анализа на сифилис, расшифровка результатов

Опубликовано: 24.04.2020
Время на чтение: 28 мин
0
2

Методы диагностики

Диагностика сифилиса имеет некоторые особенности и отличается от диагностики других бактериальных инфекций. Сложное строение и антигенные свойства бледной трепонемы обусловливают ошибки в интерпретации результатов серологических реакций.

Сдать анализ крови на сифилис предлагают 3 основным группам пациентов:

  1. Скрининг и диспансеризация групп населения (в том числе и беременность, постановка на учет в женской консультации, поступление на работу и оформление медкнижки и так далее).
  2. Скрининг в группах риска (незащищенные половые контакты с человеком, инфицированным сифилисом, лица после принудительных сексуальных контактов, ВИЧ-инфицированные и так далее).
  3. Лица, имеющие симптомы заболевания, или лица с подозрением на сифилитическую инфекцию.

Все лабораторные методы условно подразделяют на прямые и непрямые.

Прямые методы

  1. Идентификация Treponema pallidum в тёмном поле (темнопольная микроскопия).
  2. Заражение подопытных животных (культивирование в лабораторных животных).
  3. ПЦР (полимеразно-цепная реакция).
  4. ДНК-зонд или гибридизация нуклеиновых кислот.

Непрямые методы

Серологические реакции — это методы лабораторной диагностики, базирующиеся на обнаружении антител (сокращенно АТ) к антигенам бледной трепонемы (сокращенно АГ). Они имеют основное значение для подтверждения диагноза.

  1. Нетрепонемные тесты:
    • Реакция Вассермана (РСК);
    • Реакция микропреципитации (МР, РМП) и ее аналоги, которые приведены ниже;
    • Тест быстрых плазменных реагинов (RPR, РПР);
    • Тест с красным толуидином и сывороткой (TRUST);
    • Нетрепонемный тест Лаборатории исследования венерических болезней — VDRL.
  2. Трепонемные тесты:
    • Р-ция иммобилизации Treponema pallidum – РИБТ/РИТ;
    • Р-ция иммунофлюоресценции – РИФ, FTA (разведения сывороток РИФ-10, РИФ-200, РИФ-абс);
    • Р-ция пассивной гемагглютинации (РПГА, ТРПГА, TPHA);
    • Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA);
    • Иммуноблоттинг.

Эти методы сводятся к выявлению особенностей гистоморфологии сифилитических проявлений. Внимание уделяется тонкостям строения твёрдого шанкра. Однако, дифференциальная диагностика инфекции с помощью гистологии весьма затруднительна. Гистоморфология используется с другими лабораторными и клиническими тестами.

ПЦР, разработанная в 1991 году для обнаружения молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) бледной трепонемы, является высокочувствительным и специфичным, позволяет выявить фрагменты ДНК возбудителя.

Базируется данный анализ на копировании коротких участков ДНК бледной спирохеты, который удовлетворяет заданным параметрам и присутствует в образце. Всё это выполняется в искусственных условиях (in vitro). Реакция проводится в приборе — амплификаторе, который обеспечивает периодизацию температурных циклов. Происходит охлаждение с последующим нагреванием пробирок с погрешностью в 0,1˚С.

ДНК-матрицу прогревают в течение 2 минут при температуре 92-98˚С (максимальная температура используется, если полимераза термостабильна). При нагревании цепи ДНК расходятся из-за распада водородных связей между ними. В стадии отжига температуру реакции снижают для связывания праймера с одноцепочечной матрицей.

Отжиг занимает около 30 секунд, в течение этого времени синтезируются сотни нуклеотидов. Вновь синтезируемые молекулы копируются полимеразой, в результате многократно увеличиваются специфические фрагменты дезоксирибонуклеиновой кислоты. Последующая детекция фрагментов проводится с помощью электрофореза в геле агар.

Высокая чувствительность кроликов к Treponema pallidum (порядка 99,9%) позволяет применять их в диагностике сифилитической инфекции.

Вернёмся к трепонемным и нетрепонемным тестам, так как они используются чаще всего. Рассмотрим их преимущества и недостатки, а также ошибки в интерпретации результатов.

Это проба, основанная на способности комплемента связываться с комплексами АГ-АТ. Идентифицируют образовавшийся комплекс с помощью гемолитической системы. Кардиолипиновый антиген заметно повышает чувствительность пробы.

Чувствительной является и реакция Колмера, которая заключается в выполнении при различных температурных режимах. Так, первая фаза реакции Колмера протекает при температуре 20˚С в течение получаса, вторая фаза при тепературе 4-8˚С на протяжении 20-ти часов. За это время происходит связывание комплемента.

Анализ крови на сифилис – правила и методы сдачи анализа на сифилис, расшифровка результатов

При выполнении РСК возможно получение резко положительных результатов. Причиной, вероятно, является большой титр антител в неразведенной сыворотке. В этом случае пробы ставят с уменьшающими дозами.

Для дифференцировки стадий сифилиса и оценки эффективности противосифилитического лечения определяют количество АТ в сыворотке.

Позитивность пробы оценивают с помощью крестов, также в реакциях Вассермана, Колмера и Канна указывается разведение сыворотки.

В таблице 1 ниже мы привели возможные результаты анализов и их расшифровку. Как можно видеть в таблице, основное значение при расшифровке имеет комплексная оценка тестов.

Оценка реактивности тестов выполняется также «крестами»:

  1. Максимальный ответ (резко положительная проба) обозначается с помощью 4-х крестов.
  2. Положительная проба обозначается с помощью 3-х крестов.
  3. Слабоположительную реакцию обозначают двумя крестами.
  4. Один крест свидетельствует о сомнительном и отрицательном результате.
  5. Отрицательный ответ маркируют знаком «минус».

Проблема оптимизации лабораторной диагностики сифилиса не потеряла свою актуальность до настоящего времени. Современные методы диагностики, несмотря на стремление учёных привести диагностику к максимально высоким показателям чувствительности и специфичности, требуют контрольной проверки и индивидуального подхода.

Особенностью сифилитической инфекции является феномен серорезистентности, который так и не получил научного объяснения. Диагноз выставляется после полноценного обследования больного эпидемиологическими, клиническими, лабораторными методами.

На фоне экономико-технического развития медицины наблюдается и прогресс в разработке новых критериев диагностики сифилиса. Всё это позволит быстро, успешно и безошибочно лечить пациентов.

В начальной стадии можно использовать бактериоскопический метод, основанный на определении возбудителя – бледной трепонемы – под микроскопом. В дальнейшем широко используются серологические тесты, основанные на определении микробных антигенов и вырабатываемых организмом антител в биологическом материале.

Бактериологические исследование не проводят, так как возбудитель сифилиса очень плохо растет на питательных средах в искусственных условиях.

1. Прямые, которые непосредственно обнаруживают сам микроб:

  • темнопольная микроскопия (выявление трепонем на темном фоне);
  • RIT-тест – заражение исследуемым материалом кроликов;
  • полимеразная цепная реакция (ПЦР), обнаруживающая участки генетического материала микроорганизма.

2. Непрямые (серологические), основанные на выявлении антител к микробу, которые вырабатываются организмом в ответ на инфицирование.

Серологические анализы делятся на две группы

Нетрепонемные:

  • реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном (РСКк);
  • реакция микропреципитации (РМП);
  • тест быстрых плазменных реагинов (RPR);
  • проба с толуидиновым красным.

Трепонемные:

  • реакция связывания комплемента с трепонемным антигеном (РСКт);
  • реакция иммобилизации трепонем (РИТ или РИБТ);
  • реакция иммунофлюоресценции (РИФ);
  • реакция пассивной гемагглютинации (РПГА);
  • иммуноферментный анализ (ИФА);
  • иммуноблоттинг.

Методики этих анализов достаточно сложны, поэтому мы остановимся в основном на том, когда они проводятся и насколько точную информацию дают.

Сразу скажем, что основа диагностики сифилиса – серологические методы. Как называется анализ на сифилис: в каждом случае обследование может включать разные методики. Ниже мы более подробно расскажем о них.

Ни для кого не является секретом, что своевременная диагностика любого заболевания означает едва ли не половину успеха его лечения. Очень важно подобрать именно те анализы, методы или способы диагностики, которые действительно помогут поставить точный диагноз, а не запутают врача еще сильнее. Иммуноферментный анализ крови давно зарекомендовал себя методом, позволяющим не только получить положительный или отрицательный ответ на вопрос – болен ли человек какой-либо половой инфекцией, но и определить, на какой стадии развития находится заболевание, а также понять, была ли подобная проблема у пациента в анамнезе. ИФА на сифилис на сегодняшний день – один из наиболее чувствительных и специфичных анализов, при этом его точность составляет около 90%.

Тест-системы, которые использует метод иммуноферментной диагностики, предназначены для выявления не только сифилиса, но и множества других инфекций: гепатит, ВИЧ, ЦМВ, герпес, токсоплазмоз и т.д. Анализ ИФА на сифилис позволяет определить антитела (IgG, IgA, IgM) к бледной трепонеме, содержащейся в крови больного человека.

В основе иммуноферментного анализа на сифилис лежит метод взаимодействия выявляемых в крови антител с антигеном возбудителя инфекции. Диагностика будет зависеть от того, какие именно антитела использовались: могут выявляться либо антитела определенного класса, либо в общем. Для диагностики этим методом кровь берется натощак из вены.

  • Иммуноглобулин М в крови показывает, сколько времени прошло с момента заражения. Однако не всегда положительные результаты его наличия означают наличие венерического заболевания: возможно, у человека произошло обострение какой-либо хронической болезни, вызвавшее подобную реакцию.
  • Наличие антител IgA означает, что с момента заражения прошло не менее месяца.
  • Поскольку иммунитет к данному заболеванию не вырабатывается, положительный результат обследования на IgG может показывать как пик заболевания, так и период после пройденной терапии.
  • Микроскопия в темном поле

    Бледные трепонемы не могут расти на питательных средах и не визуализируются под световым микроскопом. Так как обнаружение патогена с помощью обычной микроскопии невозможно, применяют специальный микроскоп с темным полем, где возбудитель виден в виде спирали на темном фоне.

    Для проведения микроскопии забирается биоматериал с подозрительного на заболевание очага. Микроскопия в темном поле – это возможный способ оценки кожных поражений, таких как шанкр первичного сифилиса или кондилома вторичного сифилиса. Если материал макулопапулезного очага сухой, исследуют аспират лимфатического узла.

    Анализ крови на сифилис – правила и методы сдачи анализа на сифилис, расшифровка результатов

    Отрицательный результат не исключает патологический процесс, статистически выявление возбудителя возможно только в 80%.

    Биоматериал для анализа может быть любым: кровь, содержимое сифилида, спинномозговой жидкости и пр. Тест подходит для инкубационного периода.

    ПЦР полностью специфична.

    Серологические анализы (КСР или комплекс серологических реакций) считаются наиболее распространенным способом для диагностики всех стадий сифилиса. Выделяют следующие реакции:

    • агглютинации;
    • преципитации;
    • иммунофлюоресценции;
    • иммуноферментный анализ и пр.

    Также серологические анализы на сифилис подразделяют на трепонемные и нетрепонемные.

    При подозрении на приобретенный сифилис выполняют скрининговое тестирование, для чего используют нетрепонемные тесты, определяющие антитела к липоидным антигенам тканей хозяина или возбудителя в разнообразных модификациях.

    В РФ рутинно выполняют реакцию микропреципитации (РМП), которая позволяет выявить антитела к поврежденным патогеном клеткам в крови.

    Достоверность скрининга высокая, но специфичность невелика, поэтому тестирование подходит для первичного массового обследования в превентивных целях.

    Помимо этого, избыток жиров в рационе, употребление спиртосодержащих напитков и прием некоторых лекарств могут привести к ложноложительным заключениям.

    Анализ крови на сифилис – правила и методы сдачи анализа на сифилис, расшифровка результатов

    Результаты скринингового тестирования становятся положительными через 1-2 недели после образования шанкра. Нетрепонемные тесты дают отрицательный ответ через некоторое время после лечения. При ВИЧ-статусе нетрепонемные антитела могут выявляться длительно, иногда на протяжении всей жизни (что подтверждается результатами соответствующего рандомизированнного исследования).

    Другие разновидности нетрепонемных анализов:

    • VDRL,
    • плазмореагиновый тест (RPR) ,
    • проба с толуидиновым красным,
    • реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном (РСКк).

    Связывание комплемента – ответ иммунной системы на инфицирование, результат варьируется от отрицательного (ставится «-»), до резко положительного « » или 4 плюса.

    В начальной стадии первичного сифилиса RW отрицательна.

    Из-за возможности ложноположительных результатов для подтверждения любого положительного или сомнительного результата нетрепонемного анализа, используют трепонемные тесты:

    • реакция иммунофлюоресценции (РИФ);
    • гемагглютинация (РПГА),
    • иммуноферментный анализ (ИФА) для иммуноглобулинов класса G (IgG) и иммуноглобулина М (IgM);
    • иммуноблоттинг;
    • РИБТ/РИТ (реакция иммобилизации бледных трепонем).

    Трепонемные тесты не используются для оценки эффективности терапии.

    РИФ на определение трепонемных АТ класса IgG применяют после положительного результата экспресс-анализов (чувствительность 84% для первичного сифилиса и 100 % при других стадиях, специфичность 96%). Для диагностики врожденного сифилиса у новорожденных не применимы.

    В некоторых лабораториях используют «обратные» скрининговые исследования.

    CDC (Centers for Disease Control and Prevention, США) рекомендует традиционные исследования, с проверкой количественными нетрепонемными тестами, при положительном результате проводится лечение.

    • На собранный материал наносят сыворотку с мечеными флюорохромом антителами, специфичными к антигену бледной трепонемы, возбудитель притягивает к себе иммунные комплексы, из-за чего начинает светиться в люминесцентном микроскопе.
    • До появления гемагглютинации (склеивания) эритроцитов с момента внедрения бледной трепонемы должно пройти не менее 4 недель.
    • Подготовленные эритроциты с фиксированными белковыми фракциями патогена взаимодействуют с плазмой, если есть антитела к сифилису, происходит реакция.

    Подходит для подтверждения любой стадии заболевания.

    В основу положена реакция антиген-антитело. Выявляются антитела различных классов, которые можно оценить количественно.

    1. Полученные результаты позволяют судить о длительности патологического процесса, успешности проводимого лечения, иммунологическом статусе, активности возбудителей.
    2. Иммуноблоттинг – разновидность ИФА, применяют для углубленной диагностики при всех сомнительных результатах.
    3. Чувствительность и специфичность близка к 100%, на сегодняшний день ультрачувствительный метод идентификации белков.

    Способ основан на реакции антиген-антитело. Антигеном служат бледные трепонемы, культивируемые в тестикулах кролика. При взаимодействии с антителами зараженного человека, патогены утрачивают подвижность. Реакция оценивается с помощью микроскопии в темном поле.

    РИБТ в настоящее время применяют из-за трудоемкости реже, но анализ может быть полезен для решения спорных вопросов (ложноположительные реакции на сифилис).

    Наибольшую сложность представляет диагностика третичного сифилиса, что обуславливается симптомами со стороны сердечно-сосудистой и нервной системы, а также проявлениями со стороны кожного покрова.

    После сбора анамнеза переходят к физикальному осмотру, особое внимание уделяется области гениталий и ануса, слизистым оболочкам и лимфатическим узлам. Предварительный диагноз уже может быть установлен. Окончательная верификация происходит с помощью лабораторных анализов.

    Если сказать просто о сложном, то одни анализы выявляют возбудителя сифилиса, а другие отражают реакцию организма на внедрение бледной трепонемы.

    Для установки окончательного диагноза РПГА следует дополнить 1 трепонемным и 1 нетрепонемным анализом.

    Направление на анализ КСР выдается во время первого визита женщины в консультацию, и за время беременности трижды выполняется обследование. Пациентки из высокой группы риска с отягощенным анамнезом: ИППП, асоциальные, зависимые и пр. требуют особенно пристального внимания.

    Если результаты анализа положительные, проводят более глубокую диагностику, и по показаниям назначают лечение, которое зависит от стадии и клинических проявлений.

    Большинство детей с врожденным сифилисом рождаются у нелеченных матерей, либо получивших терапию слишком поздно.

    Трепонемные тесты с использованием неонатальной сыворотки не рекомендуются из-за пассивного переноса антител IgG. Все дети, рожденные от матерей с сифилисом, должны обследоваться с помощью количественного нетрепонемного серологического теста (RPR или VDRL), выполненного с использованием сыворотки крови новорожденного.

    Реакция микропреципитации, РИФ и РПГА отрицательны – норма, положительны – подтверждение сифилиса:

    • Реакция микропреципитации отрицательна, остальные положительны – сифилис в анамнезе после проведения специфической терапии, либо поздняя стадия.
    • Отрицательная РИФ при положительных РПГА и реакции микропреципитации – результат вызывает сомнения, повторная комплексная оценка.
    • Отрицательный результат РИФ и микропреципитации, но положительная РПГА – состояние после успешной антибиотикотерапии либо ложноположительный результат.
    • Положительная РИФ при отрицательных РПГА и реакции микропреципитации – ранняя стадия, проведенное лечение или недостоверность результата.
    • Положительная реакция микропреципитации, не подтвержденная ни РПГА, ни РИФ – отсутствие сифилиса.

    Инструментальная диагностика проводится в зависимости от вовлеченности органов. Например, гранулематозное поражение печени можно увидеть при компьютерной томографии брюшной полости.

    Рентгенография органов грудной клетки у пациентов с третичным сифилисом может показать дилатацию аорты. Линейная кальцификация по ходу аорты свидетельствует в пользу сифилитического аортита.

    Ангиография может быть полезна в диагностике абдоминальной сифилитической аневризмы.

    При диагностике нейросифилиса при соответствующих симптомах используют люмбальную пункцию с забором спинномозговой жидкости.

    Мишина Виктория, уролог, медицинский обозреватель

    С помощью скарификации, соскоба, сдавливания с эрозий и язвенных дефектов получают экссудат, затем исследуют в микроскоп подготовленный препарат.

    Обычно бледные трепонемы выявляют в препарате, полученном из шанкра, из очагов вторичного свежего, вторичного рецидивного сифилиса, а также пунктата лимфоузлов, плаценты.

    Основанный на феномене свечения мелких частиц в тёмном поле при попадании луча света (феномен Тиндаля), метод прекрасно позволяет дифференцировать возбудителя сифилиса от других трепонем на основании морфологических отличий и отличий в способах передвижения бактерии.

    Для микроскопии используют специальный темнопольный конденсор соответствующего оптического разрешения. Препарат получают способом раздавленной капли (каплю материала наносят на чистое обезжиренное предметное стекло и закрывают очень тонким покровным).

    На покровное стекло капают иммерсионное масло. С помощью поворота тубуса и поворота увеличивающей линзы регулируют нужное освещение.

    В тёмном поле микроскопа обнаруживаются клетки крови, эпителиальные клетки и сам возбудитель сифилиса. Бледная трепонема выглядит как спираль, очень тонкая, излучающая серебристый цвет, с плавными движениями.

    Treponema pallidum необходимо отличать от других трепонем, в том числе и Tr. refringens, которая может содержаться в ротоглотке и на слизистой половых органов. Эта бактерия совершает хаотичные движения, имеет широкие и несимметричные, довольно грубые завитки. Кроме того, Treponema pallidum отличают от Tr. Microdentium, Tr. Buccalis и Tr. vincenti.

    Почему РИБТ положительный после лечения. Анализ на сифилис РИФ

    РИФ — реакция иммунофлюоресценции — трепонемный тест. Является одним из самых чувствительных анализов на сифилис. РИФ становится положительной через 10-20 дней после инфицирования, что относит ее к методам раннего выявления сифилиса.

    Показания проведения РИФ:

    • Постановка РИФ проводится у лиц с симптомами сифилиса, при этом отрицательными реакциями — РМП, РВ;
    • в качестве дифференциальной реакции у лиц с положительными реакциями RW, микрореакции и отсутствием симптомов;
    • у беременных при отсутствии клинических проявлений и сифилиса в анамнезе.

    Методика проведения РИФ:

    • При проведении реакции в сыворотку пациента добавляется кровь кролика, зараженная бледной трепонемой(возбудитель сифилиса) и флюоресцирующая(светящаяся) сыворотка. Исследование заключается в наблюдении свечения комплексов под люминесцентным микроскопом. Результаты реакции интерпретируются в зависимости от интенсивности свечения от 1 до 4 , что указывает на наличие сифилиса. Отсутствие свечения — отрицательный результат РИФ обозначает, что обследуемый здоров. Ложные результаты анализа встречаются крайне редко при системных процессах, беременности и т.д.
    • Реакция ставится в модификации РИФ-200 и РИФ-авс(абсорбция).
    • Чувствительность реакции при первичном сифилисе составляет порядка 85%
    • при вторичном сифилисе — 100%
    • при третичном сифилисе — 98-100% .

    Негативация РИФ происходит в течение нескольких лет после лечения сифилиса. После проведенной противосифилитической терапии необходимо наблюдение за показателями в динамике.

    РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем — является самым специфичным анализом крови на сифилис. РИБТ высококачественный, дорогостоящий анализ крови, выполнение которого могут позволить себе хорошо оснащенные лабораторные комплексы.

    РИБТ является основополагающей реакцией при скрытых формах сифилиса, нейросифилисе, висцеросифилисе. Позволяет отдифференцировать ложноположительные реакции от истинного заболевания сифилисом.

    Постановка реакции основана на обездвиживании (иммобилизации) возбудителя сифилиса видоспецифичными антителами.

    Путем микроскопического исследования читается результат реакции:

    • 0-20% — отрицательная,
    • 21-30%- сомнительная,
    • 31-50% — слабоположительная,
    • 51-100% — положительная реакция.

    Анализ крови на сифилис – правила и методы сдачи анализа на сифилис, расшифровка результатов

    То есть к положительным результатам на сифилис относятся те, где РИБТ более 50%.

    При сифилисе РИБТ становится положительной достаточно медленно: в первичный периоде сифилиса она еще отрицательна, во вторичном свежем периоде — положительна в 50% случаев, во вторичном рецидивном периоде — положительна в 90-100%, в третичном периоде — положительна в 99-100%.

    Негативация РИБТ осуществляется десятилетиями, поэтому как критерий достоверности излеченности ее использовать неправомочно, тем не менее динамическое наблюдение после проведенного противосифилитического лечения необходимо.

    Реакцию целесообразно проводить через 4 недели после предполагаемого заражения. При проведении реакции к сыворотке крови пациента добавляют препарат, приготовленный из эритроцитов животного происхождения, сенсибилизированных антигеном бледной трепонемы — возбудителя сифилиса.

    Суть реакции РПГА заключается в склеивании (агглютинации) в присутствии антител к трепонеме и образовании агглютината — фигуры, которую наблюдает врач — лаборант.

    Анализ крови на сифилис – правила и методы сдачи анализа на сифилис, расшифровка результатов

    Реакция оценивается по количеству :

    • 4 — резкоположительный результат,
    • 3 — положительный,
    • 2 — слабоположительный,
    • 1 — сомнительный,
    • — — отрицательный результат.

    При положительном результате реакции проводится количественная оценка с определением концентрации (титра) антител. При прогрессировании сифилиса — титр антител постоянно растет.

    РПГА остается положительной в течение десятилетий после лечения сифилиса, поэтому не может использоваться в качестве критерия достоверности излеченности. Однако необходимо наблюдать титр антител РПГА в динамике.

    Метод обладает высокой чувствительностью. Результаты РПГА могут быть ложноположительны. К таким результатам анализа могут приводить болезни соединительной ткани, некоторые инфекции, и т.д.

    Этой болезни непостоянны, а скрытые формы вообще внешне не видны. Среди всего многообразия серологических методик, самые достоверные результаты предоставляет анализ на сифилис РИФ.

    РИФ – это реакция иммунофлюоресценции. По диагностическим возможностям эта методика относится к непрямым специфическим тестам. То есть сам возбудитель обнаружить с ее помощью не выйдет. Но по косвенным признакам можно сделать обоснованное заключение о наличии или отсутствии бледной трепонемы в организме.

    Для исследования требуются:

    • Образец крови пациента. Как правило, используется венозная, однако имеются варианты проведения РИФ с капиллярной кровью из пальца.
    • Типовой, промышленного изготовления, трепонемный антиген. Это особые белки спирохеты, которые служат «якорями» для антител к бледной трепонеме из сыворотки больного.
    • Стандартная с белками-иммуноглобулинами, которые связываются с антителами крови пациента.
    • Люминесцентный микроскоп.

    Эта реакция обладает очень высокой специфичностью и чувствительностью. Но обходится недешево и ставится не так уж и легко. Поэтому в основном используется для верификации диагноза в сомнительных и ложноположительных случаях.

    Алгоритм постановки реакции иммунофлюоресценции состоит из нескольких шагов. В немалой степени из-за сложности проведения этой методики, она не подходит для массовых скрининговых исследований.

    Анализ крови на сифилис – правила и методы сдачи анализа на сифилис, расшифровка результатов

    Сами шаги такие:

    • Полученным от пациента образцом крови/плазмы, обрабатывают предметное стекло, на котором находится высушенный трепонемный антиген. Его получают из тканей яичка кролика, зараженного спирохетой штамма Никольса.
    • Выдержав несколько минут, стекло промывают дистиллированной водой.
    • Промытый образец обрабатывают специальной сывороткой промышленного изготовления, которая содержит в себе собственные антитела к человеческим противотрепонемным антителам. Иммуноглобулины этой сыворотки заранее помечены специальным веществом, которое под ультрафиолетом светится желто-зеленым цветом.
    • Затем снова следует промывка.
    • Предметное стекло помещается в люминесцентный микроскоп и изучается.

    Если лаборант наблюдает в окуляре микроскопа характерное свечение, значит, антитела к бледной трепонеме в крови пациента были. Они связались с типовым антигеном. А на них, в свою очередь, прореагировали меченные люминофором иммуноглобулины из стандартизированной промышленной сыворотки.

    В серологической диагностике сифилиса, очень важно получить достоверный и точный результат.

    Чтобы повысить качество данных, предпринимаются определенные действия:

    • Исследуемая сыворотка разводится в 200 раз (1:200), чтоб избежать ложноположительных реакций. Тогда говорят, что проводится анализ на сифилис РИФ 200.
    • В другом варианте, при разведении сыворотки 1:5, дополнительно используется специальный абсорбент, который собирает на себе «лишние» антитела, чтоб они не искажали результаты.

    На руку исследователям играют и размеры трепонем. Крупные микробные тела спирохет хорошо заметны при люминесцентной микроскопии. Если на них «прицепляются» меченные люминофором белки из сыворотки. Использование стандартизированного антигена и сывороток, позволяет до максимума повысить чувствительность и специфичность РИФ в диагностике сифилиса.

    Анализ крови на сифилис: как сдавать и подготовиться к обследованию

    Один из альтернативных способов называется РИФ-Абс. От обычной методики он отличается низким разведением исследуемой сыворотки – 1:5 против 1:200, как обычно.

    В концентрированном образце содержится очень много активных белковых молекул.

    Чтоб избежать и повысить чувствительность, сыворотку обрабатывают специальным абсорбентом из фрагментов сифилитических спирохет. Сорбент собирает на себе излишне активные антитела и потом уже образец обрабатывают промышленной, меченной люминофором сывороткой. Благодаря такой предварительной подготовке, отсеиваются все лишние молекулы, которые могли бы повлиять на результаты теста.

    Ставят ее по таким показаниям:

    • Положительная на фоне клинического благополучия и отсутствии рисков заражения в анамнезе.
    • Позитивная РВ у больных, страдающих хроническими заболеваниями.
    • Отрицательная РВ при появлении подозрительных в отношении сифилиса симптомов.

    Первые позитивные результаты появляются уже на 15-16 день с момента инфицирования. Если реакция из положительной становится отрицательной, это сигнализирует о полном излечении от сифилиса. Вероятность ложноположительного результата составляет меньше 0,4%.

    Такая ситуация может произойти при обследовании онкобольных, алкоголиков, беременных женщин и страдающих расстройствами иммунитета людей.

    Определенная доля приходится и на технические ошибки, так как постановка достаточно сложная. Бывают случаи, когда необходимо отличить врожденную патологию от приобретенной. Сделать это можно, если поискать разные виды антител в крови пациента.

    Антитела к сифилису класса M (IgM), появляются вскоре после заражения и по времени намного опережают IgG. Выявить их позволяет анализ на сифилис РИФ абсорбции IgM.

    Если результаты постановки этой реакции будут положительными, то можно говорить о недавнем заражении. Так случаи реинфекции можно отличить от рецидива или выявить заражение ребенка после родов.

    По итогам такой методики анализов РИФ, также делают вывод об эффективности лечения раннего сифилиса.

    При подозрении на сифилис обращайтесь к опытному венерологу.

    Сифилис – одно из самых распространенных венерических заболеваний, которое поражает внутренние органы, кожные покровы и центральную нервную систему. Существует возможность заражения сифилисом не только половым, но и бытовым путем: через посуду, постельное белье, предметы личной гигиены и другие вещи, которыми пользовались или к которым прикасались больные люди.

    Чтобы определить, больны вы или нет, необходимо обратиться к врачу, который проведет осмотр и выпишет направление на анализы. Лабораторная диагностика выявляет возбудителя сифилиса – бледную трепонему.

    Показания

    Сдать кровь на сифилис (ВИЧ), гепатиты и прочие инфекционные заболевания требуется в ряде случаев. При этом пациенту не обязательно иметь симптомы этих заболеваний. Существует ряд показаний, при которых сдавать этот анализ нужно без появления симптомов.

    В первую очередь сдавать анализ крови для выявления представленной бактерии требуется людям, которые имеют случайные половые связи. Также в период подготовки к операции врач обязательно назначает этот анализ всем пациентам. В период беременности и ее планирования также нужно сдавать кровь на наличие в ней антител к бактерии. При профилактическом обследовании для некоторых категорий работников также назначают это обследование.

    При появлении определенных симптомов человек должен сдать кровь на наличие трепонемы бледной как можно скорее. К первым признакам болезни относится появление язвы на половых органах, появление обильных выделений из половых путей. Также человек может заметить, что у него увеличены лимфатические узлы, а на коже и слизистых оболочках появилась сыпь. К этим симптомам со временем прибавляется боль в костях и суставах.

    У некоторых пациентов возникает вопрос, через сколько сдавать кровь на сифилис после случайного полового контакта. Стоит отметить, что для появления в крови антител, которые сможет выявить тест, требуется время. Лабораторное обследование сможет дать достоверный результат не ранее, чем через месяц или даже 5 недель после заражения.

    Если у человека случился незащищенный половой контакт, он должен обращать внимание на состояние кожи промежности и половых органов. При появлении на них язвы нужно пройти тест через 10 дней после обнаружения этого симптома. Твердый шанкр появляется приблизительно через 3-4 недели после заражения. Поэтому тест, проведенный в первые дни после инфицирования, будет недостоверным.

    Заболевание является очень серьезным. Патология не только представляет угрозу для здоровья, но и имеет крайне высокую степень заразности. На протяжении очень длительного времени сифилис не поддавался лечению. В настоящее же время медицина сделала большой шаг вперед, от болезни теперь можно полностью избавиться.

    Исход патологии напрямую зависит от своевременности ее выявления и обращения к врачу. Важно помнить о том, что инфицирование может произойти не только половым, но и контактно-бытовым путем. Именно поэтому каждому человеку необходимо регулярно сдавать биоматериал на анализ на сифилис. Расшифровкой исследования должен заниматься врач. Человек может самостоятельно интерпретировать результаты, но нередко случается и так, что его умозаключения становятся ошибочными.

    Анализ крови на сифилис: как сдавать и подготовиться к обследованию

    Показания к исследованию:

    • Планирование беременности.
    • Оформление разрешения на проживание в общежитии.
    • Получение допуска на осуществление профессиональной деятельности.
    • Подозрение на наличие сифилиса.
    • Беспорядочные сексуальные контакты.
    • Донорство крови, ее компонентов, а также пересадка органов.
    • Контроль проведенного лечения.

    К врачу необходимо обращаться также при наличии следующих тревожных признаков:

    • Язвочки с ровными краями и плотным основанием. Как правило, они локализуются на половых органах.
    • Увеличение лимфатических узлов, находящихся в непосредственной близости от язвочек.
    • Слабость.
    • Нарушение сна.
    • Потеря аппетита.
    • Частые эпизоды головной боли.
    • Повышенная до субфебрильных значений температура тела.
    • Болезненные ощущения в суставах и мышечной ткани.
    • Бледные высыпания на кожном покрове, носящие симметричный характер.

    Данные симптомы могут свидетельствовать о наличии заболевания. При обращении к специалисту последний проведет осмотр и назначит анализы на ВИЧ, гепатит, сифилис (стандартные исследования). При получении положительных результатов врач составит максимально эффективную схему лечения.

    Трепонемные исследования

    Как сдавать кровь на сифилис? Для этого нужно обратиться в любую поликлинику или лабораторию. Кровь берут из вены на руке в локтевом изгибе. Это простая процедура, которая не занимает много времени. В ходе анализа исследуется сыворотка крови. Из нее получается выделить антитела, которые вырабатываются к трепонеме (если они есть), а также ДНК самого возбудителя.

    Бактерии, которые провоцируют развитие этого заболевания, могут быть обнаружены в соскобах из высыпаний. Ее ДНК обнаруживают в моче, соскобах со слизистой, эякуляте. Также этот материал удается получить в спинномозговой жидкости, в клетках конъюнктивы глаз и эпителия. Это биоматериал, который можно получить из тех органов, которые поражаются трепонемой.

    Для выявления болезни используют различные методики и биоматериалы. На ранних этапах сифилис определяют с помощью бактериоскопического теста. Образцы исследуют под микроскопом. Прибор позволяет обнаружить штаммы возбудителя. Позднее проводят серологические анализы крови. Благодаря им, в пробах выявляют антигены и антитела сифилиса.

    Способы определения половой инфекции поделены на 2 категории:

    • Прямые, выявляющие патогенный микроорганизм. К ним относят: темнопольная микроскопия, RIT-анализ (инфицирование кроликов биоматериалом для исследования), метод ПЦР – полимеразной цепной реакции (с его помощью находят генетические элементы возбудителя).
    • Непрямые (серологические) позволяют обнаружить антитела к патогену. Они продуцируются иммунной системой, как ответная реакция на заражение.

    Серологические методики поделены на 2 категории: трепонемные и нетрепонемные.

    • Нетрепонемные, включающие: тест с толуидиновым красным, анализ РСК, RPR- тест, исследование крови экспресс-методом РМП.
    • Трепонемные, включающие: иммуноблоттинг, РСК-тест, РИТ-анализ, исследование РИФ, РПГА-тест, ИФА-анализ.

    Информативность тестов на инфекцию различна. Чаще делают основные виды анализов на сифилис, к которым отнесены серологические методики.

    Чтобы выявить бледную трепонему – патогена, который выглядит, как спираль и вызывает сифилис, берут пробы:

    • венозной крови;
    • ликвора (секрета из спинномозгового канала);
    • содержимое лимфатических узлов;
    • ткани изъязвлений.

    Если необходимо провести тесты на обнаружение сифилиса, кровь сдают не только из локтевой вены, но и из пальца. На выбор биоматериала и способ исследования влияет тяжесть течения инфекции и оснащенность диагностического центра.

    Прямые исследования

    Убедительным доказательством сифилиса является выявление возбудителей инфекции под микроскопом. Таким способом находят патоген у 8 обследуемых из 10. Отрицательный результат у 2 оставшихся пациентов не говорит о том, что они не инфицированы.

    Анализ крови на сифилис: как сдавать и подготовиться к обследованию

    Исследование делают на первичном и вторичном этапе (стадии) заболевания, для которых характерно появление высыпаний на коже и сифилом (изъязвлений) на эпителиальных тканях или слизистых оболочках. В отделяемом из очагов поражения находят патогены, вызывающие венерическое заболевание.

    Точнее с определением трепонем справляется сложный тест, обозначающийся как РИФ – реакция иммунофлуоресценции. Образец для исследования предварительно обрабатывают флуоресцентными антителами. Соединения, способные светиться, склеиваются с бактериями. Рассматривая под микроскопом образцы, в случае заражения лаборант видит сверкающих возбудителей.

    Тест используют для раннего диагностирования болезни. Чем дольше длится заболевание, тем ниже чувствительность исследовательских способов. Кроме того, она падает после обрабатывания высыпаний и язв антисептическими средствами и у пациентов, прошедших лечение. Изредка исследование дает ложноотрицательные и ложноположительные результаты.

    RIT-анализ – высокоточный способ обнаружения сифилиса. При проведении теста результаты приходится ждать долго. До тех пор, пока у инфицированного кролика не проявятся признаки инфекции. Тест применяют очень редко, несмотря на то, что он сверхточен.

    С помощью полимеразной цепной реакции на сифилис определяют генетические элементы патогенов. Единственный недостаток ПЦР – дороговизна.

    Нетрепонемные тесты

    Анализ крови на сифилис: как сдавать и подготовиться к обследованию

    Такие анализы крови помогают выявить антитела, появляющиеся в ответ на кардиолипин – соединение, относящееся к общему строению мембран патогенов.

    Самым известным исследованием на сифилис считается реакция Вассермана. РВ входит в категорию реакций связывания комплемента (РСК). Новые методы РСК обладают существенными отличиями от традиционной RW. Но обозначаются они, как и раньше понятием «реакция Вассермана».

    Иммунная система, синтезирует антитела (маркеры) в ответ на вторжение трепонем. Их выявляют при анализе крови на сифилис методом реакции Вассермана. Положительный результат RW подтверждает инфицирование обследуемого.

    Реакция гемолиза – индекс РВ анализа. При ней взаимодействуют 2 субстанции: гемолитическая сыворотка и эритроциты барана. Сыворотку делают, иммунизируя кролика эритроцитами барана. Активность биологической жидкости снижают путем прогревания.

    Показатели РВ зависят от того, прошел гемолиз или нет. В пробе чистой от маркеров происходит гемолиз. При этом реакция на антигены невозможна. Комплемент тратится на взаимодействие с бараньими эритроцитами. Когда в образце есть маркеры, комплимент вступает в реакцию с антигенами. В этом случает гемолиз не протекает.

    Стадии и разновидности сифилиса

    Компоненты для RW отмеряют в равном количестве. Образец, содержащий сыворотку, антиген и комплимент, прогревают. Добавляют в пробу бараньи эритроциты и сыворотку. Держат при температуре 37 градусов, пока не наступит гемолиз в контрольном образце, который вместо антигена содержит физраствор.

    Для проведения РВ используют готовые антигены. На упаковках указывают титры и технологию их разбавления. Позитивный результат RW обозначается крестиками. Готовые результаты тестов обозначаются следующим образом:

    • – максимально позитивные (гемолиз задержался);
    • – положительные (гемолиз существенно запаздывает);
    • – слабо позитивные (гемолиз частично промедлил);
    • – сомнительные (гемолиз припозднился незначительно).

    При отрицательной РВ гемолиз полностью осуществился во всех образцах. Но в некоторых случаях получают ложноположительные данные. Такое происходит, когда кардиолипин входит в состав клеток. Защитные механизмы не продуцируют маркеры к «родному» кардиолипину.

    Однако изредка возникают исключительные ситуации. Положительную RW выявляют у незараженных людей. Такое возможно, если пациент перенес тяжелую болезнь, вызванную вирусами (пневмонию, малярию, туберкулез, патологии печени и крови). Положительной РВ бывает у беременных. Обусловлено это тем, что иммунитет чрезмерно ослаблен.

    Если возникает подозрение, что результат анализа на сифилис ложноположительный, пациента обследуют дополнительно. Проблема в том, что эту инфекцию невозможно выявить по единственному клинико-лабораторному тесту. Часть исследований дает ложные показатели, которые бывают как отрицательными, так и положительными.

    Получить достоверные данные помогает развернутый анализ на сифилис. Благодаря ему устанавливают истинный диагноз: доказывают заражение или исключают его. Кроме этого, расширенный тест позволяет остановить развитие инфекции, исключить проведение ненужной терапии.

    РСК и РМП

    Проводя обследование на сифилис, традиционную реакцию Вассермана применяют крайне редко. Вместо нее используют метод РСК. Анализ дает положительный результат спустя 2 месяца после инфицирования. При вторичной форме заболевания он положителен почти в 100% случаев.

    Способ микропреципитации (РМП) – исследование с механизмом аналогичным реакции Вассермана. Методика проста в исполнении. Она быстро проводится. Для исследования кровь на сифилис в этом случае сдают из пальца.

    Методика дает положительный результат через 30 дней с момента появления сифилом. Ошибки при исследовании не исключены.

    К ошибочным тестам приводит:

    • туберкулез;
    • болезнь Бенье́-Бека-Ша́умана;
    • ревматоидные заболевания;
    • рак;
    • диабет;
    • цирроз;
    • бруцеллез;
    • лептоспироз;
    • мононуклеоз.

    Обнаружив сомнительный анализ на сифилис, делают трепонемные исследования. Они помогают уточнить диагноз.

    Метод плазменных реагинов (RPR) – очередной аналог реакции Вассермана. Его применяют, когда необходимо:

    • провести скрининг бессимптомных лиц;
    • подтвердить сифилис;
    • исследовать донорскую кровь.

    Тест с толуидиновым красным, как и RPR, проводят, чтобы оценить динамику лекарственной терапии. Их показатели падают при отступлении болезни, и увеличиваются, когда патология рецидивирует.

    Нетрепонемные анализы показывают насколько больной излечился. Получение отрицательных результатов на сифилис говорит о том, что болезнь отступила полностью. Первое обследование делают спустя 3 месяца после курсовой терапии.

    Высоко результативные анализы проводят, используя трепонемные антигены. Их делают, когда:

    • получен положительный результат при методе РМП;
    • необходимо распознать ошибочные данные, возникающие при скрининговых тестах;
    • подозревают развитие сифилиса;
    • нужно диагностировать скрытно текущую инфекцию;
    • надо провести ретроспективную диагностику.

    Тесты РИФ и РИТ

    У множества пролеченных больных трепонемные исследования проб дают положительные результаты долгое время. По ним нельзя судить о степени эффективности лечения.

    РИТ и РИФ – сверхчувствительные тесты. Благодаря им получают достоверные данные. Эти анализы трудоемки, они требуют приличных временных затрат, наличия прогрессивного оборудования.

    Их способны проводить квалифицированные медработники.

    Выполняя РИФ анализ на сифилис, положительные данные получают спустя 2 месяца после инфицирования. Отрицательные параметры подтверждают, что обследуемый здоров. Положительные – позволяют предположить, что человек инфицирован.

    РИТ проводят, когда реакция микропреципитации положительна. Такой анализ крови на сифилис помогает опровергнуть или удостоверить наличие инфекции. Тест сверхчувствителен, он точно указывает заражен пациент или здоров. Но исследование дает достоверные данные только через 3 месяца после проникновения трепонем в организм.

    Анализ крови на сифилис: как сдавать и подготовиться к обследованию

    К сверхточным тестам относят иммуноблоттинг. Такой анализ крови при сифилисе делают редко. Его применяют при обследовании новорожденных детей. Он не пригоден для экспресс-тестирования. Положительные результаты получают с опозданием. Их гораздо раньше дает метод микропреципитации.

    Тесты РИФ и РИТ

    Прямые исследования

    Пройти диагностику можно как в государственном, так и частном медицинском учреждении. При наличии страхового полиса анализ в поликлинике по месту жительства сдается на бесплатной основе. Но в государственных учреждениях традиционной является реакция Вассермана.

    Для более углубленного обследования рекомендуется обратиться в частную клинику. Например, по адресу: г. Москва, ул. Рогова, 22, корп. 3, клиника «Синево». Расшифровкой анализа на сифилис там занимаются только квалифицированные специалисты. Они же при необходимости назначат лечение. Другие варианты: медцентр "Спектра" (ул. Герасима Курина, д. 16),"БестКлиник" (Спартаковский переулок, д. 2, стр. 11) и клиника "Союз" (ул. Матросская Тишина, д. 14А).

    Где можно сдать кровь на сифилис? Это распространенный метод диагностики. Поэтому его можно сдать сегодня практически в любой лаборатории или поликлинике. Второй вариант предпочтительнее, так как здесь пациенту дает направление врач. Поэтому анализ можно будет сдать бесплатно. Это особенно удобно для тех, кто проходит плановое обследование перед госпитализацией или при беременности. В остальных же случаях бесплатный анализ может не устраивать человека. Потребуется ждать определенное время, пока будет готов результат анализов.

    Также в государственных поликлиниках порой отсутствует современное оборудование. Информация о пациенте является относительно открытой. Для многих людей важно получить результат анализа быстро и точно, при этом сохраняя полную анонимность. В этом случае целесообразно обратиться в платную клинику. Частные лаборатории выполняют диагностику одним из выбранных пациентом способов.

    Существует еще один вариант пройти обследование. Ответ можно получить в течение 2 часов. Этот метод называется экстренным обследованием. Многие частные клиники предоставляют такую услугу. При этом тест проводится, по желанию клиента, в условиях полной анонимности. Даже в бланке направления не указываются личные данные человека. Поэтому решить, где сдать анализ крови на сифилис, человек должен самостоятельно. Вариантов существует множество.

    При выборе методики обследования не стоит выбирать морально устаревшую методику RW. Этот метод дает относительно большой процент ложных результатов. Поэтому стоит отдать предпочтение обследованиям РМП, RPR или их аналогам.

    Это тесты определения антител IgG и IgM к стандартизированному кардиолипиновому антигену. Их существенным недостатком является сравнительно небольшая специфичность.

    Низкая стоимость и простота выполнения позволяют отнести эти тесты к отборочным диагностическим, необходимым для установки предварительного диагноза и скрининга среди населения.

    Именно нетрепонемные тесты сдаются при оформлении медицинской книжки, устройстве на работу, постановке на учет в женской консультации.

    Недостатки:

    1. Минимальная чувствительность в стадии сифилиса первичного – 70%;
    2. Минимальная чувствительность в стадии сифилиса позднего – 30%;
    3. Возможность появления ложноотрицательных и ложноположительных результатов;
    4. Трудоёмкость выполнения РСК.

    Преимущества:

    1. Относительно маленькая стоимость производства тестов;
    2. Получение быстрого ответа;
    3. Возможность их применения для скрининга.

    Анализ крови на сифилис: как сдавать и подготовиться к обследованию

    Получение ложноположительных или слабоположительных проб возможно в следующих случаях:

    1. Нарушение технологии выполнения, при блокировании комплекса АГ-АТ.
    2. Наличие у больного аутоиммунных заболеваний (ревматоидный артирит, ревматизм, склеродермия, системная красная волчанка, саркоидоз и др.).
    3. Злокачественные новообразования.
    4. Вирусные и бактериальные инфекции.
    5. Эндокринные заболевания (аутоиммунный тиреоидит, сахарный диабет).
    6. Беременность.
    7. Употребление алкоголя.
    8. Приём жирной пищи.
    9. Старческий возраст.

    Как видно из списка, существует достаточно  причин для неверного результата. Поэтому к нему следует весьма настороженно относиться. Рассмотрим наряду с РСК ещё две пробы. Это реакция микропреципитации и VDLR (ее модификация).

    Убедительно доказывает наличие трепонем их обнаружение под микроскопом. Вероятность сифилиса при этом достигает 97%. Вместе с тем микробы можно обнаружить лишь у 8 больных из 10, поэтому отрицательный тест не исключает заболевание.

    Диагностика проводится в первичном и вторичном периодах, когда имеются твердый шанкр или кожная сыпь. В отделяемом этих заразных элементов и ищут возбудителей болезни.

    Более эффективный, но вместе с тем более дорогой и сложный анализ – обнаружение трепонем после предварительной обработки их флуоресцентными антителами. Это вещества, «прилипающие» к микробам и образующие «свечение» их в поле микроскопа.

    Чувствительность методов снижается при большой длительности болезни, обработке язв и сыпи антисептиками, а также после лечения.

    Биологический метод диагностики RIT высокоспецифичен, но дорог, а результат получается лишь через долгое время, когда у зараженного животного разовьется заболевание. В настоящее время метод практически не используют, хотя он практически самый точный из всех. Отличный анализ крови на сифилис для обнаружения генетического материала трепонем – ПЦР. Единственное его ограничение – относительная дороговизна диагностики.

    Анализ крови на сифилис: как сдавать и подготовиться к обследованию

    Отправляет пациентов на анализ врач-венеролог. Частные лаборатории делают анонимные исследования на сифилис по желанию клиента. Для сдачи теста в них не нужно направление врача.

    Правила проведения исследования:

    • Кровь в лаборатории берут утром на пустой желудок (едят после процедуры). До анализа разрешено пить только воду.
    • За 2 суток до обследования запрещено: питаться жирной едой и употреблять спиртное.
    • Кровь берут из пальца или вены.
    • Сколько длится исследование? Обычно не больше суток. Расшифровку анализов на сифилис получают у лаборантов либо лечащего врача.
    • Сколько действителен тест? По прошествии 3 месяцев результаты анализов теряют силу. Их сдают снова.

    Если расшифровка анализа показывает, что тест положителен, необходимо посетить венеролога, который назначит дополнительное обследование для точного подтверждения диагноза и подберет схему необходимого лечения.

    Диагноз нейросифилис ставят после того, как исследуют ликвор. Такой анализ делают:

    • людям со скрытой формой инфекции;
    • при симптомах заболеваний нервной системы;
    • бессимптомном, запущенном нейросифилисе;
    • выздоровевшим больным с положительными серологическими реакциями.

    Направление на исследование ликвора дает врач. Из спинномозгового канала берут пункцию в 2 пробирки. Прокол смазывают йодом, закрывают стерильной салфеткой. После процедуры пациент соблюдает постельный режим на протяжении 2 дней.

    В 1 образце определяют количество белка, клеток, следы менингита. Во второй пробе вычисляют антитела к возбудителю сифилиса. Для этого делают тесты: РВ, РМП, РИФ и РИБТ.

    В зависимости от того сколько выявлено нарушений, различают 4 разновидности ликвора. Каждая указывает на определенные повреждения нервной системы. Врач диагностирует:

    • сосудистый нейросифилис;
    • сифилитический менингит;
    • спинную сухотку и прочее.

    Помимо того, по результатам тестов судят о выздоровлении пациента.

    Интерпретация тестов – задача врача. Только он способен сделать правильные выводы, при необходимости назначить дополнительное обследование, поставить точный диагноз. Не стоит делать самостоятельную диагностику при опасной системной патологии. Ошибка в диагнозе влечет за собой серьезные последствия.

    Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ). Обязательным условием является исключение перед обследованием приема больным антибиотиков, которые оказывают токсическое действие на бледные трепонемы, вызывая их неспецифическое обездвижение.

    Положительные результаты РИБТ обнаруживаются примерно с середины вторичного свежего периода сифилиса, и могут длительно сохраняться после проведенного лечения. При необходимости метод используют для выявления АТ в СМЖ, это исследование отличает высокая специфичность, но низкая чувствительность (около 40 %).

    Кроме того, РИБТ – достаточно сложный, трудоемкий и дорогостоящий анализ, требующий высокой квалификации персонала и наличия вивария, в связи с чем в последние годы он используется лишь в отдельных лабораториях.

    В диагностике РИБТ применяется как реакция-арбитр при расхождении результатов других серологических исследований, для дифференцирования ложноположительных результатов и при установлении диагноза поздних форм сифилиса.

    Реакция связывания комплемента с трепонемным антигеном (РСК с ТА).Чувствительность метода – около 80 %, специфичность – 98 %.

    Метод входил в состав комплекса стандартных серологических реакций на сифилис, регламентированного приказом Минздрава СССР № 1161 от 02.09.1985 «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса».

    Реакция иммунофлуоресценции (РИФ). Для диагностики сифилиса используют несколько модификаций РИФ: РИФ-ц – для выявления АТ в СМЖ, РИФ-200 (тестируемую сыворотку перед реакцией разводят в 200 раз); РИФ-абс (РИФ с абсорбцией), IgM-РИФ-абс (для определения АТ IgM).

    По чувствительности и специфичности РИФ-абс не уступает РИБТ, но выполнение этого метода намного проще. Результаты РИФ-абс становятся положительными с 3–й недели после заражения (до появления твердого шанкра или одновременно с ним), это метод ранней диагностики сифилиса.

    Нередки положительные результаты исследования спустя много лет после полноценного лечения раннего сифилиса, а у больных с поздним сифилисом – на протяжении десятилетий.

    Показания для выполнения РИФ-абс:

    • положительные результаты НТТ у беременных при отсутствии клинических и анамнестических данных, свидетельствующих о сифилисе;
    • обследование лиц с различными соматическими и инфекционными заболеваниями, при которых отмечают положительные результаты НТТ;
    • обследование лиц с клиническими проявлениями, характерными для сифилиса, но с отрицательными результатами НТТ;
    • ранняя диагностика сифилиса;
    • в части случаев – как критерий успешности противосифилитического лечения: переход положительной РИФ-абс в отрицательную после лечения является 100% критерием излеченности сифилиса.
    • Возбудителем сифилиса является бледная трепонема (Treponema pallidum), которая длительное время способна скрыто находиться в организме и не проявлять себя внешними признаками.
    • Коварство этого недуга заключается еще и в том, что даже после окончания инкубационного периода патогенный микроорганизм не выявляется в мазках, при помощи которых обычно диагностируют другие венерические заболевания.
    • Именно поэтому сифилис с трудом выявляется в начале инфекционного процесса, и для устранения таких проблем в диагностике этого опасного недуга проводится анализ крови.

    Подготовка к анализу

    Исследование является весьма серьезным. Как и перед сдачей биоматериала на гепатит и ВИЧ, анализ на сифилис требует предварительного соблюдения некоторых рекомендаций.

    В первую очередь необходимо за сутки до исследования исключить из рациона жирные блюда. Их употребление приводит к опалесценции сыворотки крови. В результате и заключение, и расшифровка анализа на сифилис будут ошибочными.

    Сдача биоматериала осуществляется натощак. Перед некоторыми исследованиями не рекомендуется употреблять пищу за 12 часов. Существуют и тесты, не требующие столь длительного голодания. Для их проведения достаточно не кушать 4 часа. Врач всегда озвучивает пациенту длительность периода голодания.

    Существенно влияет на результат табакокурение и употребление спиртосодержащих напитков. Необходимо отказаться от алкоголя за 24 часа до сдачи биоматериала. За 1 час до исследования запрещено курить.

    Для получения достоверных результатов и правильной последующей расшифровки анализа на сифилис необходимо известить врача о приеме лекарственных средств. Наибольшее влияние на результат оказывают антибактериальные медикаменты. Рекомендуется сдавать анализ не ранее, чем через неделю после окончания их приема.

    Анализ крови на сифилис: как сдавать и подготовиться к обследованию

    Как сдавать кровь на сифилис? Эта процедура требует несложной подготовки. Различные методы исследования предполагают забор крови из вены или из пальца. Первый вариант применяется гораздо чаще. Если кровь берут из пальца, нужно не есть в течение 4 часов. Так как самым распространенным способом является забор крови из вены, нужно подробно рассмотреть этот вариант проведения анализа.

    Кровь на сифилис сдают натощак, не зависимо от способа тестирования. Однако при использовании в ходе анализа венозной крови человек должен не есть в течение 8 часов. Поэтому такой анализ назначают на утро. После ночного сна можно выпить воды.

    Забор биоматериала проводят до начала специальной терапии. Если требуется брать спинномозговую жидкость для анализа, эту процедуру проводят только в условиях стационара. Если берется соскоб с кожи или слизистых, подготовка вообще не будет нужна.

    Если биоматериал берется у женщин из половых путей, нужно воздержаться в течение двух дней перед анализом от спринцевания, половых контактов, а также гинекологических диагностических манипуляций.

    Метод диагностики сифилиса: иммуноферментный анализ крови – ИФА (положительный)

    Иммуноферментный анализ (сокращенно ИФА) базируется на специфической реакции антиген-антитело. Биологический материал (сыворотка крови пациента, ликвор) вносят в лунки, на твердой поверхности которых фиксированы антигены бледной трепонемы. Исследуемый материал инкубируют, затем отмывают антитела, не связавшиеся с антигенами (см. рисунок 5).

    Идентификация полученного комплекса осуществляется на этапе ферментации с помощью иммунной сыворотки, меченной ферментом. При химической реакции фермент окрашивает полученные комплексы. Интенсивность окрашивания зависит от количества специфических антител в крови пациента и фиксируется спектрофотометром.

    Чувствительность ИФА составляет более 95% . Метод используется в автоматизированном режиме для исследования декретируемых групп населения: доноров, беременных и других, для уточнения диагноза при положительных и ложноположительных нетрепонемных тестах.

    Как трактуется результат

    Анализ крови на сифилис: как сдавать и подготовиться к обследованию

    После того как пациент получает на руки результат, он может увидеть один из двух ответов: «положительный» или «отрицательный». Врач сможет сразу расшифровать, о чем говорит результат теста. Пациентам порой тяжело ориентироваться в таких ответах. Стоит отметить, что при наличии отрицательного результата, стоит его трактовать так:

    • Бактерия в организме отсутствует.
    • Возможен ранний первичный или поздний третичный сифилис.

    При получении результата теста, в котором ответ положительный, можно сказать, что в организме человека присутствует одна из форм сифилиса (первичный, вторичный или третичный) или же еще не прошел год после того, как человек вылечился. В некоторых случаях результат может быть ложноположительным или ложноотрицательным.

    Ложный результат

    Следует знать, что каждый человек может анонимно сдать кровь на сифилис. Некоторые лаборатории предоставляют подобную услугу. Результат при этом нельзя будет передать другим инстанциям, а человек при этом получает достоверные сведения о состоянии своего здоровья.

    Однако стоит знать, что в некоторых случаях возможен как ложноположительный, так и ложноотрицательный результат обследования. Частота подобных случаев невысока. Она составляет всего 5%. Ложноположительный тест получается по таким причинам:

    • Сахарный диабет.
    • Беременность.
    • Патологии соединительной ткани (например, ревматизм, красная волчанка и т. д.).
    • Недавняя вакцинация.
    • Некоторые разновидности инфекционных заболеваний (туберкулез, вирусный гепатит, мононуклеоз и т. д.).
    • Воспалительные болезни сердца.
    • Алкоголизм и наркомания.

    Ложноотрицательный анализ также имеет место. Основной причиной подобного результата является слишком раннее проведение теста. Если сифилис присутствует в организме очень давно ответ также может быть ложноотрицательным, так как в организме не вырабатываются больше антитела, которые выявляет анализ.

    Стоимость

    Сколько стоит сдать кровь на сифилис? Это зависит от многих факторов. На стоимость анализа влияет методика, которая была выбрана для исследования. Также цена может меняться в зависимости от клиники, в которой проводили обследование.

    Анализ крови на сифилис: как сдавать и подготовиться к обследованию

    Так, в государственной поликлинике можно сдать кровь на сифилис бесплатно. Врач выдает направление. После этого пациент может пройти обследований в установленный день. При этом в подобных медицинских учреждениях часто бывают очереди. Иногда приходится ждать больше часа, пока в лаборатории возьмут кровь из вены.

    Платно можно сдать скрининговые тесты (РМП, RPR). Стоимость этого обследования составляет от 350 до 400 руб. Если требуется определить наличие ДНК бактерии в разных биологических материалах (соскобы с кожи, слизистых оболочках), стоимость составит от 370 до 480 руб. Ценовая политика частной клиники во многом определяет цену анализа. Также этот показатель зависит от материалов, которые применяют в лаборатории в ходе обследования.

    Стоит отметить, чем более чувствительнее (и достовернее) достовернее тест, тем дороже он будет стоить. Так, анализ ИФА можно сдать в частной клинике по цене от 500 до 800 руб. Наиболее дорогостоящей процедурой является иммуноблот. Этот анализ стоит от 1600 до 1750 руб. Другие методики сегодня практически не используются.

    Рассмотрев, как сдавать кровь на сифилис, можно оценить особенности проведения диагностики. Существует небольшая вероятность получить ложный ответ. Но современные методы диагностики практически исключают эту возможность.

    Цена исследования зависит от выбранной методики. Стоимость стандартной реакции Вассермана составляет в среднем 200-300 рублей. Цена других исследований, как правило, не превышает 1000 рублей.

    Алгоритм диагностирования

    Для выявления сифилиса врач может посчитать целесообразным провести исследование спинномозговой жидкости. Алгоритм ее забора следующий:

    1. Пациент ложится на кушетку и поворачивается набок, прижав к животу колени.
    2. Место предполагаемого прокола обрабатывается медицинским спиртом.
    3. Врач проводит местное обезболивание при необходимости. Большая часть пациентов утверждает, что в анестезии нет необходимости. Несмотря на то что процедура сопряжена с определенным дискомфортом, она не вызывает выраженных болезненных ощущений.
    4. Стерильной иглой делается прокол в области 3-го и 4-го позвонка, чуть ниже окончания спинного мозга. Шприц извлекается после того, как в него наберется 10 мл спинномозговой жидкости. Во время процедуры также оценивается цвет и скорость течения биологического материала.
    5. Место прокола врач заклеивает пластырем.

    Если на кожном покрове пациента уже имеются язвы, ему может быть назначен анализ патологического отделяемого. Забор биоматерила осуществляется соскобом.

    В первичном серонегативном периоде (до 2 месяцев после заражения) проводят поиск трепонемы в темном поле или с использованием флюоресцирующих антител.

    При первичном серопозитивном, вторичном и скрытом сифилисе используют РМП и ИФА, а как подтверждающий тест – РПГА.

    У пациентов с рецидивами вторичного сифилиса исследуют элементы сыпи, пытаясь выделить из них трепонемы для микроскопического изучения.

    В третичном периоде РМП у трети больных отрицательная. ИФА и РПГА положительные, но они могут свидетельствовать не о третичном сифилисе, а о перенесенном ранее заболевании. Слабоположительный анализ скорее говорит о выздоровлении, чем о третичном сифилисе.

    При выставлении диагноза «врожденный сифилис» принимают во внимание наличие болезни у матери, разницу в показателях РМП у матери и ребенка, положительные ИФА и РПГА у новорожденного, иммуноблоттинг.

    Обязательно обследуются на сифилис беременные женщины, особенно те, у которых уже были роды мертвым плодом, неразвивающаяся беременность, ранние выкидыши. Им проводится РМП, ИФА, РПГА. Обследуют на наличие заболевания и перед прерыванием беременности.

    • При нахождении сифилиса в первичной фазе (до 60 дней с момента инфицирования), возбудителя отыскивают на темном фоне или используют для их обнаружения флюоресцирующие антитела.
    • Если патология находится в первичной, вторичной или скрытой форме применяют РМП и ИФА. Подтвердить результаты помогает РПГА анализ крови на сифилис.
    • При рецидивах вторичной инфекции анализируют отделяемое изъязвлений и высыпаний. Из образцов извлекают возбудителей, изучают их с помощью микроскопии.
    • Когда заболевание входит в третичную фазу, у 1/3 пациентов РМП отрицательная. При этом результаты ИФА и РПГА положительны. Однако они не всегда указывают на третичный период, а подтверждают, что человек раньше перенес инфекцию. Слабоположительный тест – доказательство полного излечения, а не развития третичной фазы.
    • Подтверждая врожденный сифилис, анализ крови берут у матери и младенца. Сравнивают данные тестов РМП. Учитывают то, что у малыша ИФА и РПГА положительны. Подтверждают диагноз, используя методику иммуноблоттинга.

    Сифилис, как любая системная патология, поражает весь организм. Поэтому обследование на него проходят при беременности, перед абортом. Пациенткам делают РМП, ИФА, РПГА.

    Правила получения анализа на сифилис

    Анализ крови на сифилис: как сдавать и подготовиться к обследованию

    Чтобы получить направление в лабораторию, нужно посетить своего участкового терапевта. Если хочется сдать анализ быстрее, это можно сделать в частной лаборатории без направления (например, лаборатории Инвитро анализ на сифилис делают быстро и анонимно).

    Как сдать анализ на сифилис? Кровь сдается с утра, натощак. Можно пить лишь чистую воду.

    Подготовка: за два дня до сдачи анализа нужно исключить из питания жирную пищу и особенно алкоголь.

    Как берут анализ? обычным способом из пальца или локтевой вены.

    Сколько делается анализ на сифилис? Результат пробы обычно бывает готов уже на следующий день. Расшифровка может быть взята у врача или в лаборатории.

    Сколько действителен анализ? На срок до трех месяцев.

    Если получен положительный результат, рекомендуется обратиться к дерматовенерологу для дообследования. Интерпретация анализов – работа врача, не стоит ломать голову самостоятельно в поисках правильного ответа.

    Анализ спинно-мозговой жидкости

    В некоторых случаях для диагностики нейросифилиса берут анализ ликвора.

    Это обследование назначается всем пациентам со скрытым сифилисом, если у них существуют признаки патологии нервной системы, а также при скрытом и позднем нейросифилисе.

    Кроме того, анализ выполняется всем пациентам после выздоровления при сохранении у них положительных серологических реакций. Мы уже писали в нашей статье, что такое явление случается нередко.

    Анализ ликвора при сифилисе назначает и проводит только врач.

    Спинно-мозговую жидкость получают путем прокола между двумя позвонками поясничного отдела. Ее собирают по 4 мл в две пробирки. Затем место пункции обрабатывается йодом и накрывается стерильной повязкой. После пункции пациент должен лежать на животе с приподнятым ножным концом кровати не менее 3-4 часов, затем он может лечь на бок. Постельный режим после пункции показан в течение двух суток.

    Ликвор из первой пробирки исследуют с помощью общепринятых реакций на содержание белка, клеток, определение признаков менингита (воспаления мозговых оболочек).

    Спинно-мозговая жидкость из второй пробирки исследуется на содержание антител к трепонеме с помощью реакции Вассермана, РМП, РИФ и РИБТ, о которых мы говорили выше.

    По степени выраженности нарушений различают четыре вида изменений ликвора. Анализируя их, врач может сделать вывод о наличии разных форм поражения нервной системы (сосудистый нейросифилис, сифилитический менингит, менинго-васкулярный сифилис, спинная сухотка, поздний мезенхимальный нейросифилис), а также о выздоровлении больного с положительными серологическими тестами.

    Предлагаем ознакомиться  Диагностика описторхоза: анализ крови, расшифровка
    , , , , , , ,
    Поделиться
    Похожие записи
    Комментарии:
    Комментариев еще нет. Будь первым!
    Имя
    Укажите своё имя и фамилию
    E-mail
    Без СПАМа, обещаем
    Текст сообщения
    Adblock detector
    //удаляем вывод миниатюры при открытии полной записи start function wph_remove_thumbnail_single($html, $post_id, $post_image_id) { if ( !is_single() ) { return $html; } else { return ''; } } add_filter('post_thumbnail_html', 'wph_remove_thumbnail_single', 10, 3); //удаляем вывод миниатюры при открытии полной записи end